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              蛋白表達服務

              金斯瑞蛋白表達服務為您提供從基因合成(免費的密碼子優化)到蛋白表達、純化等一體化服務。你可以免費使用我們的稀有密碼子優化工具,來檢測您的基因序列是否最佳,以提高您的目的蛋白表達水平。

              1.強力推薦:Guaranteed蛋白表達服務包(套餐)——3 mg已純化的可溶性蛋白(Cat.No. SC1253)

              服務內容
              交付內容
              交付時間
              • 亞克隆
              • 表達優化及測試
              • 表達并純化蛋白
              • 至少3 mg已純化的可溶性標記蛋白
              • QC報告
              • 4–5周

              2.BacPowerTM原核表達系統 (Cat.No. SC1318)

              特點
              交付內容
              交付時間
              • 亞克隆
              • 少量表達和優化
              • 蛋白表達和純化
              • SDS-PAGE以及Western blot分析
              • 已純化的可溶性蛋白
              • QC報告
              • 4–6周

              3.YeastHIGHTM酵母表達系統(高級套餐: SC1346/標準套餐: SC1257)

              特點
              交付內容
              交付時間
              • 亞克隆,重組酵母載體的擴大化培養
              • 在不同宿主中進行表達測試及表達條件的優化
              • 一步或多步親和層析法純化蛋白
              • SDS-PAGE以及Western blot分析
              • 細胞收集物或已純化的可溶性蛋白
              • QC報告
              • 4–6周

              4.BacuVanceTM桿狀病毒表達系統 (優化套餐: SC1347/標準套餐: SC1258)

              特點
              交付內容
              交付時間
              • 重組桿粒DNA的擴大化培養以及高滴定濃度的病毒繁殖
              • 使用qPCR方法或空斑檢測法確認病毒滴度
              • 用高滴定濃度的病毒感染昆蟲細胞(Sf9,Sf21,Hi5)
              • 一步或多步親和層析法純化蛋白
              • SDS-PAGE以及Western blot分析
              • 高滴定病毒株
              • 細胞收集物/ 上清液或已純化的可溶性蛋白
              • QC報告
              • 6–8周

              5.哺乳動物細胞表達系統 (Cat.No. SC1259/SC1260)

              能力
              交付內容
              交付時間
              • 瞬時表達和純化
              • 穩定細胞株構建
              • 工藝研發和轉讓
              • 大規模蛋白制備
              • 融合蛋白或無標簽蛋白
              • 穩定細胞株:3×3克隆
              • QC報告
              • 3-4周/具體時間參考具體項目

              1.用于提高基因表達水平的OptimumGeneTM密碼子優化技術

              金斯瑞先進的OptimumGeneTM密碼子優化技術能幫助您優化基因序列,使基因表達和蛋白溶解度達到較高水平。OptimumGeneTM技術還可用來優化很多與轉錄、翻譯、蛋白折疊相關的參數。

              2.較高的成功率以及豐富的重組蛋白制備經驗

              我們已經為客戶制備了數以千記的復雜蛋白,其中包括:跨膜蛋白,分泌蛋白,蛋白酶以及其它的酶類,成功率均在90%以上。金斯瑞制備的重組蛋白已成功應用于靶點確認、酶鑒定、抗體制備、高通量篩(HTS)、 構象研究以及SAR(結構-活性關系)。

              3.BacPowerTM技術和FoldArtTM蛋白折疊技術

              金斯瑞自主研發的BacPowerTM技術和FoldArtTM蛋白折疊技術,使蛋白難表達和蛋白難溶等問題迎刃而解。

              4.全面的服務

              金斯瑞能為您提供基因合成,蛋白表達,穩定細胞株生產,抗體制備以及免疫檢測等一體化服務。

              5.高質量的服務

              金斯瑞高質量的蛋白表達服務,可滿足您對蛋白的純度高、活性強、交付時間快等需求。金斯瑞交付的蛋白一般純度在95%以上,內毒素水平低于0.01 EU/μg。

              1.生物活性蛋白

              藥物研發過程中,制備和純化后的蛋白具有生物活性是十分必要的。金斯瑞先進的設備和專利的制備方法,保證了交付給客戶的蛋白均具有生物活性。我們進行蛋白表達與免疫檢測相結合,交付給客戶的高質量、高活性蛋白,甚至超過了客戶的預期,具體請參考下面的示例。我們通過對細胞破壁方法進行優化,提高了純度大于90%的目標蛋白的獲得量。

              • Fig.A: SDS-PAGE analysis of the fractions upon the IEX chromatography 。
              • Lane 1-47: Gradient elution fractions
              • Lane M: Low weight marker (Jinsite, Cat. No. MM0906)
              • Lane S: The supernatant after homogenizer with high pressure
              • Lane ft: Flow through
              • Fig.B: Enzyme assay monitoring the fractionation by DEAD Sepharose
              • Fig. C: Fractions pooled based on activity analysis for further ADP Sepharose affinity purification
              • Fig. D: SDS-PAGE analysis of the purified protein
              • Lane M: Low weight marker (Jinsite, Cat. No. MM0906)
              • Lane S: The supernatant after homogenizer with high pressure
              • Lane ft: Flow through
              2.蛋白折疊

              金斯瑞專利的蛋白折疊技術,可以解決原核系統內由于過量表達而帶來的蛋白活性喪失、折疊錯誤、蛋白發生集聚反應不能溶解等問題。我們可以成功溶解并折疊含有95%以上包涵體的目標蛋白(請參考下述示例),折疊蛋白的純度高達85%以上。金斯瑞交付給客戶的折疊蛋白儲存于特制緩沖液中。

              • Fig. Refolded protein of sample was analyzed by SDS-PAGE followed by Coomassie Brilliant Blue staining
              • Lane M: Smart Protein Standard (Jinsite, Cat. No. MM0900)
              • Lane 1: Refolded protein of sample
              3.標簽去除

              重組蛋白中如果含有表位附加標簽,可能會導致蛋白結構改變、產生毒性,甚至喪失活性。為了避免這類問題,很多客戶在蛋白表達后要求去除標簽。在下面的示例中,金斯瑞使用SUMO蛋白酶,成功去除了標簽。獲得的目標蛋白標簽去除率為80%,純度高達90%以上。

              SDS-PAGE checking purification of protein after tag cleavage by SUMO protease

              Fig. A:

              • Lane M: Smart Protein Standard (Jinsite, Cat.No. MM0900)
              • Lane 1: Refolded fusion protein with SUMO-tag

              Fig. B:

              • Lane M: Smart Protein Standard (Jinsite, Cat.No. MM0900)
              • Lane 1: Recovered protein after 1st incubation with Ni-resin
              • Lane 2: Recovered protein after 2nd incubation with Ni-resin
              • Lane 3: Elute with 300 mM imidazole from Ni-resin of 2nd incubation
              • Youngjin Park, Mohd Amir F. Abdullah, Milton D. Taylor, Khalidur Rahman, and Michael J. Adang. Enhancement of Bacillus thuringiensis Cry3Aa and Cry3Bb toxicities to coleopteran larvae by a toxin-binding fragment of an insect cadherin. Appl. Envir. Microbiol. May 2009; 75(10): 3086-3092
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